Page 19 - InvUnivMult2004

Facultad de Ciencia y Tecnología
mediante espectrofotometría a 420 nm. Para determinar de manera cuantitativa si existen diferencias significativas entre los grupos (p<0.05), se realizó la prueba estadística de Tukey (Sigma Stat 2.03).
Resultados
Análisis espectrofotométrico en multiplaca ELISA. En todos los pozos se añadió L-dopa como sustrato, un componente de membrana de microorganismo (LPS o Laminarina) y hemolinfa. En los pozos experimen- tales se agregó un inhibidor de prostaglandinas (dexametasona) a diferentes concentraciones.
En el grupo 1, que contenía LPS como activador de la reacción inmune, se observó una melanización que se consideró como testigo para comparar la concentración de melanina obtenida.
El grupo 2 fungió como un segundo grupo control (sin dexametasona), en el cual se utilizó laminarina co- mo activador.
Al grupo 3 se le añadió dexametasona 12.5 μg/μl y LPS como activador. La melanización obtenida fue intensa, análoga a los grupos control.
Al grupo 4 se le añadió dexametasona 25 μg/μl y LPS. Se observó una reducción en la melanización respecto al grupo 3, pero no en relación con los grupos control.
El grupo 5 se trabajó con dexametasona 50 μg/μl y laminarina. La concentración de melanina disminuyó respecto a los grupos control y a los dos grupos experimentales anteriores.
Tabla 1. Cuantificación de la producción de melanina en multiplaca ELISA por espectrofotometría (ABS 420 nm)
Grupo
HL
Dexametasona
Laminarina
LPS
L-dopa
Absorbancia (420nm)
1 (Control)
+
-
-
+
+
0.000
2
+
-
+
-
+
0.036
3
+
+
-
+
+
0.290
4
+
+
-
+
+
0.055
5
+
+
+
-
+
0.001
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INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 3, No3, DICIEMBRE 2004
Cuantificación de melanina (420 nm) en los diversos tratamientos de los pozos de la multiplaca ELISA.