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Método
Se utilizaron 28 conejos machos de la raza Nueva Zelanda, con un peso de 2.5 a 3.5 Kg.; estos se dividieron en forma aleatoria en 3 grupos con cuatro conejos cada uno, para los tiempos de evaluación a 1, 2 y 5 semanas. En el Departa- mento de Cirugía de la Facultad de Medicina de la UNAM, se realizó la cirugía en la cresta iliaca de la cadera (figura 1a), la cual consistió en la elaboración de una perforación de 3 mm de diá- metro por 10 mm de longitud en ambas crestas iliacas de cada conejo. La cresta iliaca derecha fue experimental (figura 1b), en la cual se implantó el xenoinjerto Nukbone® de hueso de bovino liofilizado de forma cilíndrica, mientras que la cresta iliaca izquierda fue control (figura 1b), en donde la perforación no tuvo ningún tratamiento para la regeneración ósea.
Figura 1. Descripción ósea del conejo
a) Localización general de la cresta iliaca de conejo (il). b) Cresta iliaca control (sin injerto; Ctrl) y Cresta iliaca experimental (con Nukbone®; Exp).
Todos los procedimientos de manejo, anestesia y cirugía se realizaron de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana relacionada con los animales de laboratorio. De esta manera, se sacrificaron los conejos con una dosis de 60 mg/kg de pentobarbital sódico a las 1, 2 y 5 semanas. Las muestras de las crestas iliacas se obtuvieron por medio de una disección con una sierra de diamante. Por último, las muestras se fijaron en formol al 10% durante 24 hrs.
Posteriormente, en el Laboratorio de Ciencias Morfológicas de la Facultad de Ciencia y Tecnología de la Universidad Simón Bolívar, las muestras fijadas fueron lavadas con agua corriente y se descalcificaron con ácido nítrico al 15%, a temperatura ambiente y durante un periodo de 5 a 21 días dependiendo del tamaño de la muestra. A continuación, se lavaron con agua corriente, se deshidrataron con alcoholes graduales y fueron aclaradas con xilol para ser incluidas en parafina con un punto de fusión de 54 oC. Después se realizaron cortes utilizando el microtomo por rotación con un grosor de 7 μm y se tiñeron con las técnicas de Hematoxilina- Eosina (H-E), Nitrato de Plata (N.P.) y Tricrómica de Gallego (T.G.) (Aguilar, et al., 1996). Por último, se observaron al microscopio óptico para determinar el proceso celular durante la regeneración ósea.
Resultados
La cresta iliaca de cadera de conejo se encuen- tra formada por hueso compacto (figura 2a) y hueso esponjoso (figura 2b). El primero muestra una formación de láminas con osteocitos orga- nizados en un acomodo concéntrico alrededor del conducto de Havers, mientras que el hueso esponjoso se dispone en trabéculas formadas por osteocitos y una matriz extracelular de láminas paralelas.
Facultad de Ciencia y tecnología
InvEstIgaCIón UnIvErsItarIa MUltIDIsCIplInarIa - año 5, no5, DICIEMbrE 2006 29