Page 129 - InvUnivMult2013

Facultad de Ciencia y Tecnología
entre la microbiota existente entre animales de vida silvestre y ejemplares de cautiverio, para estimar si existe una relación importante y significativa entre el tipo de alimentación y la forma de vida del animal con respecto a su microbiota normal.
En el estudio realizado en las excretas de coyote, fue posible la identificación de Enterobacterias por medio de la obtención de cepas puras y la aplicación de pruebas bioquímicas (MacFaddin, 2000). El proce- so se llevó a cabo por medios de cultivo EMB (Eosin Metil Blue) que permitió la purificación de las cepas, ya que es un medio específico para bacterias Gram- negativas y de bacterias pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae. Además es un medio diferencial que permite analizar la capacidad de las bacterias de fermentar o no la lactosa o sacarosa. Este medio per- mitió realizar una identificación preliminar de dos de las cepas obtenidas en el análisis de las excretas, las cuales fueron Escherichia coli y Enterobacter. En el caso de E.coli se presentó el crecimiento de una colonia mucosa y cóncava que presentaba un brillo metálico, que es una característica de crecimiento en el medio EMB de la cepa. Enterobacter se caracterizó por presentar colonias mucosas de color morado con un centro obscuro, lo cual indicaba que se trataba de una bacteria fermentadora de lactosa. La tercer cepa que se identificó fue Klebsiella sp., la cual se aisló en el medio Mac Conkey, el cual también es específico de Enterobacterias fermentadoras posi- tivas de lactosa. Se dedujo el género por el aspecto mucoso, rosado y de borde redondo, considerando también el cambio de coloración de rojo a rosa que presentó el medio de cultivo, al promover su creci- miento en medio Mac Conkey (Ausina. V y Moreno S, 2006; MacFaddin, 2000).
Al tener las cepas puras y la identificación prelimi- nar de dichos géneros, se prosiguió a realizar las pruebas bioquímicas de cada cepa en medio Citrato Simmons, medio SIM y medio RM-VG, que se divide en rojo de metilo y Vogues-Proskauer. En el análisis de resultados, todas las cepas analizadas presenta- ron un resultado negativo a la utilización del citrato como única fuente de carbono y a la capacidad de fermentar el carbono absorbiendo el nitrógeno del amonio y convertirlo en amoniaco, por lo que el medio no presentó un cambio en la coloración de verde a azul. El medio SIM, es un medio que evalúa tres pruebas, producción de sulfitos, movilidad y producción de indol. En cuanto a motilidad E.coli y Enterobacter fueron positivos debido al entur- biamiento del medio a la presencia de flagelos
en las bacterias, los cuales no presenta Klebsiella por lo que su resultado fue negativo, presentaron resultados positivos Klebsiella y Enterobacter en la producción de sulfitos ya que son capaces de utili- zar el hierro, el azufre y la peptona para producir sulfuro ferroso que es lo que lleva a que se forme el precipitado negro en el medio. Por último la prueba indol sólo dio positivo para Klebsiella, en donde se esperaba un resultado negativo, al igual que en el caso de Enterobacter. La única prueba positiva debió de ser para E.coli, debido a que es una bacteria que presenta la enzima triptofanasa que metaboliza el aminoácido triptófano a indol, dándose una coloración roja debido a la reacción y al reactivo de Kovac (Ausina y Moreno, 2006; García- del Valle y Zamudio, 1998).
En la prueba de rojo de metilo, la cual es una prueba cuantitativa de la producción de ácidos fuertes por medio de la fermentación de la glucosa, se presen- tó un resultado positivo para E.coli y Klebsiella. En cambio en Vogues-Porskauer sólo fue positivo En- terobacter, indicando con esto que Enterobacter es capaz de fermentar la glucosa presente en el medio y generar butanodiol, debido a que es una bacteria generadora de este compuesto por naturaleza. En el resto de las cepas observamos un resultado ne- gativo porque fermentan ácidos mixtos, pero no antes mencionados. La presencia de las bacterias identificadas en este trabajo; en vida silvestre; tales como Escherichia coli, Klebsiella spp, y Enterobacter sp; es debido a que son bacterias que se encuentran normalmente en el tracto digestivo, en específico en el intestino grueso y finales del delgado, tanto de humanos como en animales homeotérmicos, esto se debe a que la importancia de dichas bacterias se centra en la capacidad de sintetizar vitamina K y reducir los problemas gastrointestinales en la absor- ción de grasas y nutrientes en el organismo (Ausina y Moreno, 2006; Madigan et. al., 1999).
Un hallazgo que sorprendió al elaborar las tinciones de las cepas, fue encontrar levaduras creciendo jun- to con bacterias sobre todo en medio LB. De acuerdo a la literatura, esto se debe a que lagomorfos y roedores presentan en su microbiota regular la pre- sencia de levaduras como Cyniclomyces guttulatus (anteriormente conocida como Saccharomycopsis guttulata) después del destete, y estos animales al ser las principales presas del coyote, funcionan como vectores para la transmisión de las levadu- ras al coyote. Dicho esto, se puede considerar a la levadura como un microorganismo común dentro
INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 12, No 12, ENERO - DICIEMBRE 2013
129