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Facultad de Ciencia y Tecnología
el tamaño de las nanopartículas con fármaco fue ligeramente mayor que las vacías, debido a la incorporación del fármaco dentro de la matriz lipídica. No se observó gran diferencia en el índice de polidispersidad entre las nanopartículas vacías y las cargadas con fármaco al utilizar las diferentes cantidades de tensoactivo, todos estuvieron en un intervalo aceptable, obteniéndose distribuciones monodispersas que son indicativo de la homoge- neidad de la formulación.
Adicionalmente al emulsificante principal, po- loxámero 407, se utilizó lecitina de huevo como cotensoactivo, pues se sabe que un tensoactivo por sí solo no es capaz de estabilizar las nanopartí- culas formadas, y por lo tanto una vez generadas, éstas se aglomeran, llevando a un incremento en el tamaño de partícula (Podaralla y Perumal, 2012), esto es debido a que los valores de HLB requeridos para emulsificar la mezcla de lípidos (Compritol y Precirol) están entre 2 y 5. Mientras que el valor de HLB de la lecitina es de 8 y el del poloxámero de 22, lo cual hace posible que se obtengan sistemas oleoacuosos. Con respecto al potencial Z, estos valores varían entre -12 y -16 mV, éstos se deben principalmente a la carga superficial que imparte la lecitina; en general se espera que las partículas pueden dispersarse establemente cuando su valor absoluto de potencial Z, es lo suficientemente alto y hay repulsión eléctrica entre ellas, sin embargo, no solo la carga superficial puede proporcionar estabi- lidad, también los estabilizantes de tipo polimérico pueden proporcionarla por medio de impedimento estérico entre las partículas, en este caso el poloxá- mero realizó esta función complementaria (Pugh y Fowkes, 1984; Pugh, Matsunaga y Fowkes, 1983), sin embargo para asegurar estabilidad éstas fueron liofilizadas.
Microscopía Electrónica de Transmisión (TEM).
Los análisis de TEM confirmaron partículas de SLN esféricas, estas partículas se ven agregadas, esto puede observarse en la figura 2; a diferencia de la dispersión láser, la microscopía electrónica mostró que las partículas están compuestas de partículas más pequeñas, esta diferencia se debe a las con- diciones de observación, en la dispersión laser se emplea muestras dispersas en un medio líquido, y las partículas se encuentran separadas y con un radio hidrodinámico adicional, lo cual hace que el tamaño de partícula parezca un poco mayor; por otra parte, en la microscopía electrónica de transmisión se hace uso de muestra previamente liofilizada, y por lo tan-
to cambian las condiciones (Bootz, Vogel, Schubert y Kreuter, 2004).
Antibiogramas SLN con ketoconazol. Los an- tibiogramas preliminares mostraron que las SLN presentan mejor actividad antifúngica comparado con el ketoconazol comercial ya que generaron una mayor zona de inhibición, cuyo diámetro fue de 15 mm comparado con los 5 mm del ketocona- zol comercial, ambas muestran se probaron a una concentración de 50 _g/disco (tabla 2 y figura 3-I).
Con respecto a las formulaciones comerciales, se llevaron a cabo dos antibiogramas, utilizando discos con muestra comercial de Nizoral (ketoconazol) en dos diferentes presentaciones, tableta y suspensión con 1 mg/disco y 10 mg/disco respectivamente. Am- bas formas farmacéuticas mostraron tener actividad antimicótica contra C. álbicans. Los diámetros de las zonas de inhibición fueron las siguientes, para el fármaco en tabletas 5 mm y para la contenida en suspensión fue de 10 mm (figura 3-II).
Si se comparan los diámetros de las zonas de inhi- bición, el ketoconazol cargado en nanopartículas produjo un diámetro de 15 mm con solo 50 _g/disco, en tanto que el ketoconazol contenida en suspen- sión produjo un diámetro de 10 mm, pero con 10 mg/disco, es decir con 200 veces más del fármaco, por lo cual podemos concluir que el ketoconazol contenido en SLN mejora en 200 veces su eficacia en comparación con el ketoconazol incluido en formas farmacéuticas convencionales. Los resultados vali- dan el supuesto inicial en el cual se ha observado que al incluir un fármaco en acarreadores nanométricos se mejora su actividad terapéutica, esto es resultado del gran área superficial que se crea en estos siste- mas, por lo tanto hacen que las moléculas se en- cuentren libres para ejercer su actividad terapéutica, como se comprobó con los antibiograms realizados (Briones, Isabel Colino y Lanao, 2008; Patro, 2013).
Formulación y caracterización de las SLN in- corporadas en gel de carbopol. El hidrogel fue preparado disolviendo 0.25 % de carbopol 940 en agua deionizada. La formulación optimizada de ke- toconazol en SLN incluyó el Precirol/Compritol 888, lecitina de huevo y pluronic F128. Las nanopartículas cargadas fueron incorporadas con éxito en el hidro- gel de carbopol con agitación mecánica y después fueron almacenadas a 4 °C por 12 horas para permi- tir la distribución homogénea dentro del hidrogel y de esta forma darles mayor estabilidad química.
INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 12, No 12, ENERO - DICIEMBRE 2013
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