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La carencia de reactivos de diagnóstico para hacer ensayos inmunológicos en el área de fisiología vegetal planteó la necesidad de fabricar anticuerpos policlonales. En el presente trabajo se elaboraron anticuerpos policlonales a partir de la síntesis de conjugados (hapteno-acarreador) para dos reguladores de crecimiento vegetal, uno de tipo auxina, el ácido 2,4-Diclorofenoxiacético (2,4-D) y otro de tipo citocinina, la Kinetina (Kin). La molécula acarreadora fue la proteína albúmina de suero bovino. La inmunización se realizó en conejos hembra de 2.5 kg de peso, de la cepa New Zealand. La cantidad y calidad de los antisueros se evaluaron por medio de las técnicas de precipitación en capilar y doble difusión de Oüchterlony. Se obtuvieron títulos de 1:128 y 1:512 para el suero anti-2,4-D-proteína y el suero anti-Kin-proteína, respectivamente. Además, se distinguieron dos sistemas antígeno-anticuerpo en cada uno de los antisueros elaborados contra cada uno de los conjugados sintetizados. Los resultados evidenciaron que fue posible obtener conjugados hapteno-acarreador con el regulador de crecimiento vegetal Kin, con capacidad para generar la producción de anticuerpos policlonales.
Palabras clave: conjugados, reguladores de crecimiento vegetal, anticuerpos policlonales Abstract
The lack of diagnostic reagents for immunological plant assays raised the need to produce polyclonal antibodies. In this paper, polyclonal antibodies were developed from the synthesis of conjugated (hapten-carrier) for two plant growth regulators, one of type auxin 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and another type cytokinin, kinetin (Kin).The protein carrying molecule was bovine serum albumin. Immunization was performed on female rabbits weighing 2.5 kg, New Zealand strain. The quantity and quality of the antisera were assessed by means of the capillary precipitation and Oüchterlony double diffusion. Titers were obtained 1:128 and 1:512 for the anti-2 ,4-D-protein and serum anti-Kin-protein, respectively. We also observed two antigen-antibody systems at each of the antisera produced against each of the conjugates synthesized. The results showed that it was possible to achieve hapten-carrier conjugates with plant growth regulator Kin, capable of generating polyclonal antibodies.
Keywords: conjugates, plant growth regulators, polyclonal antibodies INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 12, No12, ENERO - DICIEMBRE 2013
Facultad de Ciencia y Tecnología
Producción de sueros hiperinmunes contra los reguladores de crecimiento vegetal, ácido 2,4-diclorofenoxiacético y kinetina
Production of hyperimmune sera against plant growth regulators, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and kinetin
Resumen
Margarita Ivonne Garrido-Gutiérrez1, Sergio Zavala-Castillo2, 3, Silvia Paola de la Torre-Altamirano1 y María Dolores Utrera-Barillas1 1 Facultad de Ciencia y Tecnología, Universidad Simón Bolívar, México. 2Centro de Investigación y Estudios Avanzados, IPN, México.
3Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México. maguigarrido@yahoo.com bonita_paola_13@hotmail.com utreradolores@yahoo.com.mx
Recepción: 27 de junio de 2013 Aceptación: 28 de octubre de 2013 (pp. 164 - 170)