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INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 8, No8, DICIEMBRE 2009
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Ciencia y Tecnología
Identificación de la serpina 4A como una proteína regulada por la hematofagia en el mosquito Aedes aegypti
Juan Antonio Garibay-García1, Febe Elena Cázares-Raga1, Alicia Chagolla-López4, Pavel Sierra-Martínez5, Mario Henry Rodriguez-López2 y Fidel de la Cruz Hernández-Hernández1-3
1CINVESTAV-IPN 2Centro de Investigación Sobre Enfermedades Infecciosas del Instituto Nacional de Salud Pública (CISEI-INSP) 3Universidad Simón Bolívar 4CINVESTAV-IPN (Unidad Irapuato) 5Universidad Autónoma de Guerrero
Resumen
Para las hembras del mosquito Aedes aegypti es fundamental la obtención de sangre de vertebrados como fuente de nutrientes para la reproducción, por lo que el estómago pre- senta adaptaciones para la digestión, incluyendo la síntesis de proteasas y precursores de matriz peritrófica, entre otras, las cuales no han sido totalmente descritas. En este trabajo se estudió la dinámica de las moléculas del estómago durante el proceso de digestión de la sangre. Para este fin, las proteínas presentes en los estómagos de mosquitos Ae. aegypti alimentados con azúcar y con sangre a diferentes tiempos, se analizaron mediante electro- foresis en gel de acrilamida en presencia de SDS (PAGE-SDS). En los estómagos de mosquitos alimentados con azúcar se observaron numerosas bandas y varias de ellas cambiaron su intensidad después de una alimentación con sangre. En los estómagos analizados a las 3, 6 y 9 h post-alimentación con sangre (PAS), se observaron nuevas bandas, siendo las más notorias las de 100, 85, 36, 55, 45, 40, 36, 29, 27 y 18 kDa. Dentro de las proteínas inducidas por la alimentación con sangre se seleccionó la banda de 40 kDa para su identificación (por MALDI-TOF/MS) como serpina 4 de Ae. aegypti, un inhibidor de serina proteasas reportado como una proteína hipotética. Esta proteína es un ortólogo de la serpina 4A de Drosophila melanogaster, que participa en la regulación de la secreción de proteínas mediante la inhi- bición de la proprotein convertasa similar a subtilisina, la cual es una molécula importante en la vía de secreción de proteínas.
Palabras clave: Aedes aegypti, análisis proteómico, serpina 4 (Srp4). Abstract
It is fundamental that the Aedes aegypti mosquito females obtain blood from vertebrates as a source of nutrients for reproduction; their midgut has been adapted for blood diges- tion, including the synthesis of proteases and peritrophic matrix precursors, among others, which have not yet been described in full. During this work, the dynamics of the midgut molecules was studied while the blood is undergoing the digestion process. To this aim, proteins present in the Ae. aegypti mosquito midguts, fed with sugar and with blood at different times, were analyzed by electrophoresis in acrylamide gel in the presence of SDS (PAGE-SDS). Numerous bands were observed in the midguts of mosquitoes fed with sugar