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INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 8, No8, DICIEMBRE 2009
Ciencia y Tecnología
and several of these bands changed in intensity after mosquitoes were fed with blood. In the midguts analyzed at 3, 6 and 9 hours post-feeding with blood (BPF), new bands were observed, the most notorious being the 100, 85, 36, 55, 45, 40, 36, 29, 27 and 18 kDa. Among the proteins induced by the blood fed, the 40 kDa band was selected to be identified (by MALDITOF/MS) as Ae. aegypti serpin 4, a serine protease inhibitor reported as a hypotheti- cal protein. This protein is an ortholog of Drosophila melanogaster’s serpin 4A, which is involved in the regulation of the protein secretion by inhibiting the proprotein convertase similar to subtilisin, which is an important molecule in the protein secretion path.
Keywords: Aedes aegypti, proteomic analysis, serpin 4 (Srp4).
Introducción
El mosquito Aedes aegypti es un insecto cosmopolita capaz de trasmitir agentes infecciosos, incluyendo el virus del dengue, causante de una enfermedad de gran importancia en salud pública en México y el mundo. Tanto los machos como las hembras de Ae. aegypti se alimentan de néctares; sin embargo, las hembras requieren, además, al menos una comida de sangre para obtener los nutrientes básicos para el desarrollo de la progenie. Es durante la alimentación con sangre que la hembra adquiere agentes infeccio- sos, en el caso de alimentarse de un huésped infec- tado. Y si éstos se desarrollan exitosamente pueden ser transmitidos durante la siguiente alimentación (Qi et al., 2008). Ae. aegypti presenta un aparato digestivo compuesto de intestino anterior, medio y posterior (Corena et al., 2005). El intestino medio o estómago está compuesto de una monocapa de células epiteliales de tipo columnar que presentan una región apical con microvellosidades y otra basal en contacto con una matriz extracelular, fibras mus- culares, fibras nerviosas y traqueolas (Corena et al., 2005; Okuda et al., 2002). Las funciones del intestino medio incluyen la síntesis y secreción de enzimas digestivas, de componentes de matriz peritrófica, así como la absorción de nutrientes provenientes de la sangre. Este órgano está dividido en dos regiones: el intestino medio anterior y el posterior. Las células de la región anterior presentan una gran cantidad de microvellosidades, retículo endoplásmico liso abundante y un laberinto basal bien desarrollado involucrado en la absorción de carbohidratos (Oku- da et al., 2002). La región posterior del intestino medio está formada por células de tipo columnar y escamosas; las primeras son las más abundantes y presentan un extremo apical con microvellosidades, un retículo endoplásmico rugoso bien desarrollado
y gran cantidad de mitocondrias. Se cree que esta región se encuentra relacionada con la síntesis y secreción de enzimas proteolíticas, así como con la absorción de productos de digestión de la sangre (Corena et al., 2005; Okuda et al., 2002). Después de una alimentación con sangre ocurren numerosos cambios morfológicos, bioquímicos y moleculares en el estómago del mosquito hembra (Corena et al., 2005; Onken et al., 2004; Zieler et al., 2000), entre ellos se induce la síntesis y secreción de diferentes tipos de proteínas, incluyendo endopeptidasas tipo tripsina y quimiotripsina, serina proteasas, capaces de digerir los componentes de la sangre. En Ae. aegypti se reportó que durante la digestión se sintetizan dos tipos de tripsina, la temprana y la tardía. Antes de la alimentación con sangre existen mensajeros que codifican para la tripsina temprana pero que están inhibidos en su traducción hasta que la sangre, en una primera fase inmediatamen- te después de la ingestión, induce la síntesis de la proteína continuando durante las siguientes 4 a 6 h. La segunda fase se caracteriza por la producción de grandes cantidades de tripsina tardía entre las 8 y 36 h después de la alimentación con sangre, la cual induce la síntesis de novo de mensajeros (Noriega y Wells, 1999). Después de una ingesta de sangre, las células epiteliales del estómago se aplanan y sintetizan y secretan la matriz peritrófica (MP) que es una capa acelular que cubre el bolo alimenticio (Davenport et al., 2004; Pascoa et al., 2002; Shen y Jacobs-Lorena, 1998).
Objetivo
Durante la alimentación con sangre en los mosquitos ocurren modificaciones metabólicas para la diges-