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INVESTIGACIÓN UNIVERSITARIA MULTIDISCIPLINARIA - AÑO 14, No14, ENERO - DICIEMBRE 2015
Facultad de Ciencia y Tecnología
Sin embargo todos los medicamentos mencionados anteriormente, si bien regulan los niveles de glucosa en sangre, presentan efectos secundarios adversos como son hipoglucemia, aumento de peso y desor- denes gastrointestinales (Havale y Pal, 2009). Los medicamentos de última generación para el control de diabetes se basan en inhibir la enzima dipeptidil peptidasa–IV (DPP-IV), responsable de degradar a las hormonas incretinas: péptido 1 análogo al glucagón (GLP-1) y el péptido insulinotrópico dependiente de glucosa (GIP); que inducen la síntesis de insulina (Baggio y Drucker, 2007).
Las células enteroendocrinas en el epitelio gastro- intestinal secretan más de 20 péptidos que influyen en la motilidad intestinal, reparación epitelial, adiposidad, regulación del apetito y homeostasis de la glucosa, como las incretinas, GLP-1 y GIP. Las incretinas son responsables de liberar ~70% de in- sulina de forma posprandial (Vilsbøll y Holst, 2004; Holst y Gromada, 2004; Baggio y Drucker, 2007). Sin embargo, la vida media de estas hormonas es de aproximadamente 2 y 5 minutos para GLP-1 y GIP respectivamente (Meier et.al., 2004) debido a su rápida inactivación por la enzima DPP-IV. La DPP-IV (EC 3.4.14.5) es una serin proteasa que se expresa en la superficie de células endoteliales y epiteliales que modula la actividad de varios péptidos biológicamen- te activos, presenta afinidad por polipéptidos que tengan prolina o alanina en la penúltima posición del extremo amino terminal, como lo son GLP-1 y GIP, dejando a estas incretinas inactivas (Deacon, Nauck, Meier, Hucking y Holst, 2000), por lo que los inhibidores de la DPP-IV representan una alternativa para el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2 (Deacon y Holst, 2002).
En la literatura se ha informado a través de análisis “in silico” la presencia de péptidos inhibidores de la DPP-IV, así como en proteínas de origen alimentario, como lo son las proteínas del suero de leche (Tulipa- no, Sibilia, Caroli y Cocchi, 2011; Tulipano, Cocchi y Caroli, 2012), caseínas de la leche de vaca, coláge- no de la carne de bovinos y colágeno del salmón (Lacroix y Li-Chan, 2012b); así como los que se han obtenido por hidrólisis enzimática de proteínas de la leche (Gunnarsson et.al., 2006; Lacroix y Li-Chan, 2012a), salvado de arroz (Hatanaka et.al., 2012), del atún (Huang, Jao, Ho y Hsu, 2012) y del amaranto (Soriano-Santos et.al., 2015).
Objetivo
• Realizar un análisis químico proximal a las variedades de frijol Flor de Mayo, Peruano, Negro Jamapa y Bayo Azteca.
• Aislar y caracterizar fisicoquímicamente los hidrolizados proteínicos obtenidos del frijol (Phaseolus vulgaris L.) con capacidad de inhibir la enzima dipeptidil peptidasa - IV.
Método
Análisis químico proximal del grano de frijol
Se realizaron los métodos oficiales del A.O.A.C. (2000). Determinación de humedad por el método de la estufa (método No. 14004); determinación de cenizas por incineración (método No. 14006); determinación de proteína cruda por Kjeldahl (método No. 2.049); determinación de fibra cruda por hidrólisis ácida y alcalina (método No. 7.054); determinación de extracto etéreo por el método de Soxhlet (método No. 7.056); y determinación de extracto libre de nitrógeno (considerado como carbohidratos, obtenido por diferencia).
Muestras biológicas
Las muestras fueron seleccionadas de acuerdo la preferencia de su consumo a nivel nacional (SE, 2012) siendo las variedades comunes: Flor de Mayo, Peruano y Negro Jamapa y una cuarta variedad Bayo Azteca, fue obtenida del Campo Experimental del Valle de México (CEVAMEX) del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP), cosecha 2014, campo Santa Lucia.
Molienda de los granos de frijol.
Los granos de frijol (Phaseolus vulgaris L.) fueron so- metidos a una molienda previa utilizando un molino, la harina obtenida se pasa a través de un tamiz con un tamaño de malla de 0.250 mm (No. 60).
Extracción de la fracción proteínica
Las proteínas del grano de frijol fueron extraídas siguiendo el método de Betancur-Ancona, Gallegos- Tintoré, y Chel-Guerrero (2004) con algunas modifi- caciones, una muestra de 50 g de harina de frijol se mezcló con 300 mL de Na2SO4 al 5% (0.04 M) durante